當(dāng)前位置:首頁 > 產(chǎn)品展示 > PCR檢測試劑盒 > PCR檢測試劑盒 > 弧菌通用PCR檢測試劑盒品牌
推薦產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱:弧菌通用PCR檢測試劑盒品牌
英文名稱:Vibrio spp.PCR
規(guī)格:詳見說明書
類別:PCR檢測試劑盒
運輸:低溫、避光、快遞免費送貨上門。
用途:生化實驗,合成實驗等試驗。
運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個月。
自備試劑:樣品 RNA。?
性能指標(biāo):點擊了解更多PCR檢測試劑盒。
.試劑盒檢測特異性為00%
2. 檢測試劑盒重現(xiàn)性為00%
3. 靈敏度可達(dá)到03/ml
4. 有效期為6個月
?
使用方法:
一、樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴(yán)格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),
反應(yīng)終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。?鄰/對甲苯酯 28804-47-9 50次
3-苯鹽鹽 288-99-4 30次 Plant Total Protein Miniprep Kit (SDS-PAGE) 常溫保存
三氮唑 288-36-8 30次 Plant Total Protein Miniprep Kit (2DE) 常溫保存
6,7-二甲氧基-2,4-喹唑啉二酮 28888-44-0 00次 Plant Total Protein Miniprep Kit (3DE) 常溫保存
方 2892-5-5 50次
二氯異尿鈉 2893-78-9 50次
Fmoc- 29022--5 50次 Fungal Total Protein Miniprep Kit 4℃保存(溶液B成分二需-20℃保存)
吡 290-37-9 30次 Bacterial Total Protein Miniprep Kit 4℃保存
2-氟苯酰 2905-2-7 50次 Bacterial Membrane Protein Miniprep Kit 4℃保存、DNase I需低溫保存
2-氯苯酰 2905-23-9 50次
4-乙炔聯(lián)苯 29079-00-3 50次
間氯苯異酯 2909-38-8 50次
2-(*硅基)乙醇 296-68-9 8次 Bacterial Surface Protein Isolation Kit -20℃保存
三氟乙 2923-8-4 0次 Phosphate Protein Enrichment Kit -20℃保存
2 , 3-二溴-5-基吡 29232-39- 0次 Glycoprotein Isolation Kit (ConA) -20℃保存
弧菌通用PCR檢測試劑盒品牌2,2-二羥基聯(lián)苯 規(guī)格:25mg Nefazodone Related Compound B
3,5-二羥基甲苯 規(guī)格:200mg
,4-二甲氧基 規(guī)格:ea
,4-二(4-甲基-5基-2-咪唑)苯 規(guī)格:5mg Neotame Related Compound A
4-羥基偶氮苯 規(guī)格:50mg
代苯 規(guī)格:00mg Oleoyl Polyoxylglycerides
4-甲氧基偶氮苯 規(guī)格:25mg
,3,5-三溴苯 規(guī)格:50mg Ondansetron Resolution Mixture
乙基 規(guī)格:0mg
,2,4-*苯 規(guī)格:50mg
鄰二甲苯 規(guī)格:20mg
間二甲苯 規(guī)格:0mg Oseltamivir Related Compound A
對二甲苯 規(guī)格:20mg
2,3-二氨基萘 規(guī)格:20mg
2,2-二羥基二代-6,6-聯(lián)萘 規(guī)格:20mg
企業(yè)信息
ENTERPRISE INFORMATION上海谷研實業(yè)有限公司
3004918891發(fā)送信件產(chǎn)品分類
CLASSIFICATION