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性能指標(biāo):點(diǎn)擊了解更多PCR檢測(cè)試劑盒。
.馬隱秘桿菌PCR檢測(cè)試劑盒試劑盒檢測(cè)特異性為00%
2. 檢測(cè)試劑盒重現(xiàn)性為00%
3. 靈敏度可達(dá)到03/ml
4. 有效期為6個(gè)月產(chǎn)品名稱:馬隱秘桿菌PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Arcanobacterium equiPCR
規(guī)格:詳見(jiàn)說(shuō)明書
類別:PCR檢測(cè)試劑盒
運(yùn)輸:低溫、避光、快遞免費(fèi)送貨上門。
用途:生化實(shí)驗(yàn),合成實(shí)驗(yàn)等試驗(yàn)。
運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個(gè)月。
自備試劑:樣品 RNA。
使用方法:
一、馬隱秘桿菌PCR檢測(cè)試劑盒樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴(yán)格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),
反應(yīng)終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。?Platinum(IV) oxide無(wú)水鉑克BR,99%
Platinum tetraiodide(SP-4-)-化鉑250毫克AR,99%
Platinum鉑金絲0克CP
Platinum白金克AR,99%
PLA2磷酯酶A2克層析純,70u/mg
PLA聚(L-乳)克BR,99%
PK磷轉(zhuǎn)稱酶5克BR,2500~7000u/mg,牛血
PIPES sesquisodium salt,4-二磺倍半鹽00克AR
PIPES,4-二磺0克BR,
Piperine胡椒辣堿克BR,99.
00毫克GR,99%
Piperacillin sodium salt哌00毫克53000~22000,凍干粉
Piperacillin氧5UBR,牛心,95%
Pimelic acid蒲桃0.5毫升高純,99%
Pimaricin納他霉素00毫克BR
馬隱秘桿菌PCR檢測(cè)試劑盒肌醇 英文名稱: Inositol CAS號(hào):87-89-8 規(guī)格:20mg
蓮心堿(93%) 英文名稱:Liensinine CAS號(hào):2586-96- 規(guī)格:20mg
蓮心堿高氯酸鹽 英文名稱:Liensinine perchlorate CAS號(hào):5088-90-4 規(guī)格:20mg
甲基蓮心堿 英文名稱:Neferine CAS號(hào):2292-6-2 規(guī)格:20mg
異蓮心堿 英文名稱:Isoliensinine CAS號(hào):687-4-0 規(guī)格:20mg
4-甲氧基水 英文名稱:2-Hydroxy-4-methoxybenzaldehyde CAS號(hào):673-22-3 規(guī)格:20mg
芥子堿硫酸鹽 英文名稱:Sinapine thiocyanate CAS號(hào):743-77-8 規(guī)格:20mg
5-甲基-7-甲氧基異黃酮 英文名稱:5-Methyl-7-methoxyisoflavone CAS號(hào):8257-2-2 規(guī)格:20mg
巨大戟醇 英文名稱: Ingenol CAS號(hào):30220-46-3 規(guī)格:20mg
3'-甲氧基-5'-羥基異黃酮-7-O-β-D-葡萄糖苷 英文名稱:3’-methoxy-5’-hydroxyisoflavone-7-O-β-D-glucoside CAS號(hào): 規(guī)格:0mg
注意事項(xiàng):
①馬隱秘桿菌PCR檢測(cè)試劑盒加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
企業(yè)信息
ENTERPRISE INFORMATION上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
3004918891發(fā)送信件產(chǎn)品分類
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