產(chǎn)品名稱：PCR試劑盒
規(guī)格：48T/盒
運(yùn)輸：低溫、避光、快遞免費(fèi)送貨上門。
用途：生化實(shí)驗(yàn)，合成實(shí)驗(yàn)等試驗(yàn)。
運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個(gè)月。
自備試劑：樣品 RNA。?
性能指標(biāo)：點(diǎn)擊了解更多熒光-PCR法。
.試劑盒檢測特異性為00%
2. 檢測試劑盒重現(xiàn)性為00%
3. 靈敏度可達(dá)到03/ml
4. 有效期為6個(gè)月

?

使用方法:
一、樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意：可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二：RT（逆轉(zhuǎn)錄）反應(yīng)合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系（20 μL 體系）
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴(yán)格按順序加入 6μL RT Buffer（含 dNTP）和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），
反應(yīng)終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應(yīng)，然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用，丌需要純化。
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)*，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 5-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至0kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.～umol或0～00pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
?乙氧甲酰基亞乙基三苯基膦 577-37-3　0U　ATP Sulfurylase　-20℃保存

4-甲苯硼 395356　000U　E. coli DNA Ligase　-20℃保存

2-甲氧苯硼 395388　200U　T4 DNA Ligase　-20℃保存

4-甲氧苯硼 5720-07-0　000U　T5 DNA Ligase　-2℃保存

2,3,4,6-四乙酰氧基-alpha-D-吡喃葡萄糖溴化物 572-09-8　000U　Taq DNA Ligase　-20℃保存

-叔丁氧羰基哌 57260-7-6　2500U　9°N  DNA  Ligase　-20℃保存

3-氯-2-啶甲 57266-69-0　000U　T4 RNA Ligase　-20℃保存

2-溴蒽醌 572-83-8　000U　T4 RNA Ligase 　-20℃保存

N-BOC-GAMMA-氨基丁 57294-38-9　50U　T4 RNA Ligase 2　-20℃保存

9-溴菲 573-7-　2000U　T4 RNA Ligase 2(truncated)　-20℃保存

戊*鈉 57-33-0　2000U　T4 RNA Ligase 2(truncated K227Q)　-20℃保存

2-氨基-4-氯-6-甲氧基嘧啶 5734-64-5　200U　ATP Dependent DNase　-20℃保存

5-氯-2-氟苯 5738-34-7　00mg　DNase I Powder　4℃或-20℃保存

2-溴-5-氟苯 5738-39-2　.5mL　DNase I Solution　4℃（短期）或-20℃（*）保存

PCR試劑盒肉浸液瓊脂  規(guī)格: 0.ml  Rat Insulin Receptor β,ISR-β

Hugh-Leifson培養(yǎng)基  規(guī)格: 0.ml  Rat Insulin-like growth factor ,IGF-

西蒙氏檸檬鹽培養(yǎng)基  規(guī)格: 0.2ml  Rat Insulin-like growth factor 2,IGF-2

克氏檸檬鹽培養(yǎng)基  規(guī)格: 0.ml  Rat Insulin-like growth factor binding protein ,IGFBP-

亞鐵瓊脂  規(guī)格: 0.5ml  Rat Insulin-like growth factor binding protein 2,IGFBP-2

乳糖膽鹽發(fā)酵管培養(yǎng)基  規(guī)格: 0.2ml  Rat Insulin-like growth factor binding protein 3,IGFBP-3

乳糖發(fā)酵管培養(yǎng)基  規(guī)格: 0.2ml  Rat Insulin-like growth factor binding protein 4,IGFBP-4

乳糖復(fù)發(fā)酵管培養(yǎng)基  規(guī)格: 0.2ml  Rat Proinsulin,PI

煌綠瓊脂  規(guī)格: 0.ml  Rat insulin autoantibodies,IAA

煌綠增菌液  規(guī)格: 0.ml  Rat islet cell antibody,ICA  

GN增菌液  規(guī)格: 0.ml  Rat Amylin

*培養(yǎng)基  規(guī)格: 0.ml  Rat ghcagons-like pepfide ,GLP-

WS瓊脂  規(guī)格: 0.ml  Rat alcohol dehydrogenase,ADH

5%純度乳糖發(fā)酵管  規(guī)格: 0.2ml  Rat aldehyde dehydrogenase,ALDH

Honda氏產(chǎn)毒肉湯基礎(chǔ)  規(guī)格: 0.ml  Rat acetylcholine,ACH