人原鈣黏素 ELISA試劑盒酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
使用說明書elisa法測定
規(guī)格：48T/96T
本試劑盒僅供體外研究使用!
ELISA法定量測定人尿液或其它相關(guān)生物液體中人原鈣黏素 ELISA試劑盒的含量。

標(biāo)本的采集及保存
. 血清：全血標(biāo)本請于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜后于000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 000 g離心5分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注：標(biāo)本溶血會(huì)影響zui后檢測結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。
標(biāo)本的稀釋原則：
首先通過文獻(xiàn)檢索的方式了解待測樣本的大致含量，確定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi)，檢測的結(jié)果才是準(zhǔn)確的。稀釋的過程中，應(yīng)做好詳細(xì)的記錄。zui后計(jì)算濃度時(shí)，稀釋了“N”倍，標(biāo)本的濃度應(yīng)再乘以“N”。
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋原則：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至ml，蓋好后靜置0分鐘以上，然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為50 U/L，做系列倍比稀釋后，分別稀釋50 U/L，25 U/L，2.5 U/L，6.25 U/L，3.2 U/L，.56 U/L，0.78 U/L，樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 U/L，臨用前5分鐘內(nèi)配制。
如配制25 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.5ml（不要少于0.5ml）50 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
標(biāo)記抗體的稀釋原則： 臨用前以標(biāo)記抗體稀釋液稀釋，稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制（每孔00μl），實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.-0.2ml。如0μl標(biāo)記抗體加990μl標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素的稀釋原則：
臨用前以辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液稀釋，稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制（每孔00μl），實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.-0.2ml。如0μl辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素加990μl辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
操作步驟 實(shí)驗(yàn)開始前，請?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí)，用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品00μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)20分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加標(biāo)記抗體工作液 00μl（取μl標(biāo)記抗體加99μl標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡-2分鐘，200μl/每孔，甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液（同標(biāo)記抗體工作液） 00μl，37℃，60分鐘。
5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡-2分鐘，200μl/每孔，甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色，后3-4孔顯色不明顯，即可終止）。
7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后5分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。

反復(fù)凍融。

公司其他類別試劑盒產(chǎn)品展示：anti-Melamine  抗三聚氰胺
Anti-4-3-3  4-3-3 蛋白
Anti-2,4-D（2,4-Dichlorophenoxyacetic acid）  2，4-二氯苯氧乙酸 /除草劑/激素型除草劑
Anti-2,4-D（2,4-Dichlorophenoxyacetic acid）  2，4-二氯苯氧乙酸 /除草劑/激素型除草劑單克隆
Anti-5-HT（5-hydroxytryptamine）  5-羥色胺
Anti-5-HTRA （5-HTA （5-hydroxytryptamine/serotonin receptor A; 5HTa; ADRBRL; ADRB2RL; HTRA）  5-羥色胺受體A
Anti-5-HTB （5-hydroxytryptamine/serotonin receptor B）  5-羥色胺受體B（5-HT/serotonin RB）
Anti-5-HTR2A  5-羥色胺受體2A
Anti-5-LOX （5-lipoxygenase）  5-脂氧合酶
anti-8-OHdG（8-hydroxy-2-de-axyguanine）  8-羥基脫氧鳥苷
Anti-AACT-α （chymotrypsin-Alpha）  α-抗胰
Anti-AAT（Alpha- antitiypsin）  α-抗
Anti-AATF（Apoptosis-antagonizing transcription factor）  拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子
Anti-ABCB6（ATP-binding cassette, sub-family B, member 6）  ABCB6