臨床檢驗(yàn)ABS試劑盒應(yīng)用

    IgM抗體的檢測用于傳染病的早期診斷中。間接法ELISA試劑盒一般僅適用于檢測總抗體或IgG抗體。如用抗原包被的間接法直接測定IgM抗體，因標(biāo)本中一般同時(shí)存在較高濃度的IgG抗體，后者將競爭結(jié)合固相抗原而使一部份IgM抗體不能結(jié)合到固相上。因此如用抗人IgM作為二抗，間接測定IgM抗體，必須先將標(biāo)本用A蛋白或抗IgG抗體處理，以除去IgG的干擾。在臨床檢驗(yàn)中測定抗體IgM時(shí)多采用捕獲包被法。先用抗人IgM抗體包被固相，以捕獲血清標(biāo)本中的IgM（其中包括針對抗原的特異性IgM抗體和非特異性的IgM）。然后加入抗原，此抗原僅與特異性IgM相結(jié)合。繼而加酶標(biāo)記針對抗原的特異性抗體。再與底物作用，呈色即與標(biāo)本中的IgM成正相關(guān)。此法常用于病毒性感染的早期診斷。甲型肝炎病毒（HAV）抗體的檢測模式見圖2-7。

    類風(fēng)濕因子（RF）同樣能干擾捕獲包被法測定IgM抗體，導(dǎo)致假陽性反應(yīng)。因此中和IgG的間接法近來頗受青睞，用這類試劑檢測抗CMV IgGM和抗弓形蟲IgM抗體已獲成功。

2.2.7 ABS-ELISA試劑盒法

    ABS為親和素（avidin）（biotin）系統(tǒng)（system）的略語。親和素是一種糖蛋白，分子量60000，每個(gè)分子由4個(gè)能和結(jié)合的亞基組成。為小分子化合物，分子量244。用化學(xué)方法制成的衍-羥基琥珀酰亞胺酯可與蛋白質(zhì)和糖等多種類型的大小分子形成標(biāo)記產(chǎn)物，標(biāo)記方法頗為簡便。與親和素的結(jié)合具有很強(qiáng)的特異性，其親和力較抗原抗體反應(yīng)大得多，兩者一經(jīng)結(jié)合就極為穩(wěn)定。由于一個(gè)親和素可與4個(gè)分子結(jié)合，因此如把ABS與ELISA試劑盒法可分為酶標(biāo)記親和素-（LAB）法和橋聯(lián)親和素-（ABC）法兩種類型。兩者均以標(biāo)記的抗體（或抗原）代替原人ELISA試劑盒系統(tǒng)中的酶標(biāo)抗體（抗原）。在LAB中，固相先與不標(biāo)記的親和素反應(yīng)，然后再加酶標(biāo)記的以進(jìn)一步提高敏感度。在早期，親和素從蛋清中提取，這種卵親和素為堿性糖蛋白，與聚苯乙烯載體的吸附性很強(qiáng)，用于ELISA中可使本底增高。從鏈霉菌中提取的鏈霉親和素則無此缺點(diǎn)，在ELISA試劑盒應(yīng)用中有替代前者的趨勢。由于ABS-ELISA試劑盒較普通ELISA試劑盒多用了兩種試劑，增加了操作步驟。