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谷研試劑-人,3-βD葡葡糖苷酶(,3-βD-Glu)酶聯免疫分析 試劑盒使用說明書

更新時間:2014-01-08 點擊量:900

谷研試劑-人,3-βD葡葡糖苷酶(,3-βD-Glu)酶聯免疫分析  試劑盒使用說明書

 

本試劑盒僅供研究使用。

  96T

使用目的:

本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中           ,3-βD   葡葡糖苷酶(,3-βD-Glu)

表達。

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人 ,3βD 葡葡糖苷酶(,3βDGlu)表達。用純化的

人 ,3βD 葡葡糖苷酶(,3βDGlu)抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中 ,3-βD

葡葡糖苷酶(,3-βD-Glu)相結合,經洗滌除去未結合的抗原和其他成分后再與 HRP 標記的

,3-βD   葡葡糖苷酶(,3-βD-Glu)抗體結合,形成抗體 抗原 酶標抗體復合物,經過*洗

滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終

的黃色。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),與 CUTOFF 值相比較,從而判定

標本中人 ,3-βD 葡葡糖苷酶(,3-βD-Glu)的存在與否。

試劑盒組成

 

    30 倍濃縮洗滌液

2     酶標試劑

3     酶標包被板

4     樣品稀釋液

5     顯色劑 A 液

6     顯色劑 B 液

標本要求

 

20ml× 瓶

6ml× 瓶

2 孔×8 條

6ml× 瓶

6ml× 瓶

6ml×/瓶

 

7      終止液

8      陽性對照

9      陰性對照

0     說明書

    封板膜

2     密封袋

 

6ml× 瓶

0.5ml× 瓶

0.5ml× 瓶

2 張

 

.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能

馬上進行試驗,可將標本放于20℃保存,但應避免反復凍融

2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

操作步驟

.      編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照

孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)

 

 

 

2.      加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照            50%l。然后在待測樣品孔先

加樣品稀釋液                                        40%l,然后再加待測樣品    0%l。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不

觸及孔壁,輕輕晃動混勻,

3.    溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4.    配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

5.    洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此

重復 5 次,拍干.

 

6.    加酶:每孔加入酶標試劑 50%l,空白孔除外。

7.    溫育:操作同 3。

8.    洗滌:操作同 5。

9.    顯色:每孔先加入顯色劑 A50%l,再加入顯色劑 B50%l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色

5 分鐘.

0.   終止:每孔加終止液 50%l,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

.   測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。     測定應在加終止

液后 5 分鐘以內進行。

操作程序總結:

計算和結果判定:

試驗有效性:陽性對照孔平均值≥.00;  陰性對照平均值≤0.0

臨界值(CUT OFF)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.5

陰性判定:樣品 OD 值<  臨界值(CUT  OFF)者為 ,3-βD 葡葡糖苷酶(,3-βD-Glu)

陰性

陽性判定:樣品 OD 值≥  臨界值(CUT  OFF)者為 ,3-βD 葡葡糖苷酶(,3-βD-Glu)

陽性

注意事項

.操作嚴格按照說明書進行,本試劑不同批號組分不得混用。

2.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 530 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未

用完,板條應裝入密封袋中保存。

3.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

4. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

5.底物請避光保存。

6.試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準,使用雙波長檢測時,參考波長為 630nm

7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。終止液為 2M 的硫酸,使用時必須

注意安全。

保存條件及有效期

.試劑盒保存:;28℃。

2.有效期:6 個月

聯系方式

郵箱:[email protected] 地址:上海市嘉定區澄瀏公路52號盛創企業
咨詢熱線

021-39921927

(周一至周日9:00-19:00) 在線咨詢
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